Kalkulator prawa Lamberta-Beera

Ten kalkulator prawa lamberta-beera rozwiązuje A = ε·l·c dla absorbancji, stężenia lub molowego współczynnika absorpcji. Przykład: ε = 6220 L/(mol·cm), 1 cm i 50 µmol/L dają A = 0,311.

Przykład: Co obliczyć: Absorbancję A (i transmitancję) · Molowy współczynnik absorpcji ε 6220 L/(mol·cm) · Droga optyczna l (kuweta) 1 cm · Stężenie c 50 µmol/L → Wynik: A = 0,311 · transmitancja T = 48,8652 %. Źródło: IUPAC Gold Book: Beer–Lambert law (A = ε·c·l). Stan na: .

L/(mol·cm)
Zależy od substancji i długości fali, np. NADH przy 340 nm: 6220 L/(mol·cm).
cm
Zwykle 1 cm.
µmol/L
1 µmol/L = 10⁻⁶ mol/L.
Moje narzędziaWpisane dane są zapisywane tylko w tej przeglądarce.

Wynik

Wynik
A = 0,311 · transmitancja T = 48,8652 %
Wszystkie postacie
WielkośćWartość
Absorbancja A0,311
Transmitancja T = I/I₀48,8652 %
Molowy współczynnik absorpcji ε6220 L/(mol·cm)
Droga optyczna l1 cm
Stężenie c50 µmol/L
Kroki obliczeń
  • A = ε·l·c = 6220 L/(mol·cm) · 1 cm · 50 · 10⁻⁶ mol/L = 0,311.
  • T = 10^(−A) = 10^(−0,311) = 48,8652 %.
Prawo obowiązuje dla roztworów rozcieńczonych i światła monochromatycznego; przy dużej absorbancji (powyżej ok. 1,5), rozpraszaniu lub asocjacji pomiar od niego odbiega.

Jak to obliczamy

Prawo Lamberta-Beera opisuje, jak silnie roztwór osłabia światło o danej długości fali. Absorbancja A jest proporcjonalna do stężenia substancji i do drogi optycznej – to podstawa fotometrii.

Wzór

A = ε · l · c, gdzie ε to molowy współczynnik absorpcji w L/(mol·cm), l droga optyczna w cm, a c stężenie w mol/L. Transmitancja to T = I / I₀ = 10^(−A), a odwrotnie A = −log₁₀(T). Po przekształceniu: c = A / (ε·l) lub ε = A / (l·c).

Przykład

NADH pochłania przy 340 nm z ε = 6220 L/(mol·cm). W kuwecie 1 cm przy c = 50 µmol/L A = 6220 · 1 · 50 · 10⁻⁶ = 0,311, a transmitancja T = 10^(−0,311) = 48,8652 %. Odwrotnie: A = 0,311 przy tych samych ε i l daje c = 50 µmol/L, a z A, l i c wychodzi ε = 6220 L/(mol·cm). Przy A = 1 przechodzi 10 % światła, przy A = 2 tylko 1 %.

Najczęściej zadawane pytania

Czym różni się absorbancja od transmitancji?

Transmitancja T to procent światła przechodzącego; absorbancja to A = −log₁₀(T/100). A = 0,311 odpowiada T = 48,8652 %.

Jak obliczyć stężenie z absorbancji?

Ze wzoru c = A / (ε·l). Dla A = 0,311, ε = 6220 L/(mol·cm) i l = 1 cm wychodzi 50 µmol/L.

Do jakiej absorbancji obowiązuje prawo?

W zależności od aparatu do ok. A = 1–1,5. Powyżej liczy się światło rozproszone i próbkę należy rozcieńczyć.

Źródła i podstawa prawna

Stan na: · Zasady redakcyjne

Podobne narzędzia