Wet van Lambert-Beer berekenen
Hier kunt u de wet van lambert-beer berekenen voor absorptie, concentratie of extinctiecoëfficiënt. Voorbeeld: ε = 6220 L/(mol·cm), 1 cm en 50 µmol/L geven A = 0,311.
Voorbeeld: Wat moet berekend worden: Absorptie A (en transmissie) · Molaire extinctiecoëfficiënt ε 6.220 L/(mol·cm) · Weglengte l (cuvet) 1 cm · Concentratie c 50 µmol/L → Resultaat: A = 0,311 · transmissie T = 48,8652 %. Bron: IUPAC Gold Book: Beer–Lambert law (A = ε·c·l). Bijgewerkt: .
Zo wordt het berekend
De wet van Lambert-Beer beschrijft hoe sterk een oplossing licht van een bepaalde golflengte afzwakt. De absorptie A is evenredig met de concentratie van de stof en de weglengte van het licht – de basis van de fotometrie.
Formule
A = ε · l · c met de molaire extinctiecoëfficiënt ε in L/(mol·cm), de weglengte l in cm en de concentratie c in mol/L. De transmissie is T = I / I₀ = 10^(−A) en omgekeerd A = −log₁₀(T). Omgeschreven: c = A / (ε·l) of ε = A / (l·c).
Voorbeeld
NADH absorbeert bij 340 nm met ε = 6.220 L/(mol·cm). In een cuvet van 1 cm met c = 50 µmol/L is A = 6.220 · 1 · 50 · 10⁻⁶ = 0,311 en de transmissie T = 10^(−0,311) = 48,8652 %. Omgekeerd geeft A = 0,311 met dezelfde ε en l de concentratie c = 50 µmol/L, en uit A, l en c volgt ε = 6.220 L/(mol·cm). Bij A = 1 komt 10 % van het licht door, bij A = 2 nog maar 1 %.
- Absorptie is logaritmisch: een toename van 1 betekent tien keer minder doorgelaten licht.
- Meet bij voorkeur tussen A = 0,1 en 1; verdun daarboven.
- De meting heeft een blanco (cuvet met oplosmiddel) als nulpunt nodig.
Veelgestelde vragen
Wat is het verschil tussen absorptie en transmissie?
De transmissie T is het percentage doorgelaten licht; de absorptie is A = −log₁₀(T/100). A = 0,311 komt overeen met T = 48,8652 %.
Hoe bereken ik de concentratie uit de absorptie?
Met c = A / (ε·l). Voor A = 0,311, ε = 6.220 L/(mol·cm) en l = 1 cm is dat 50 µmol/L.
Tot welke absorptie geldt de wet?
Afhankelijk van het apparaat tot ongeveer A = 1 tot 1,5. Daarboven speelt strooilicht een rol en moet het monster verdund worden.
Bronnen en wettelijke basis
- IUPAC Gold Book: Beer–Lambert law (A = ε·c·l)
- Harris, Quantitative Chemical Analysis, Kap. „Spectrophotometry“
Bijgewerkt op: · Redactioneel beleid
Vergelijkbare tools
- Molariteit berekenenMolariteit berekenen: mol/L uit massa en volume, af te wegen massa voor een oplossing, molariteit uit massaprocent en dichtheid, en eenvoudige stoichiometrie.
- Verdunning berekenen: concentratie, mengverhouding en mengkruisVerdunning berekenen met C1·V1 = C2·V2: hoeveel concentraat en water, eindconcentratie, mengverhouding zoals 1:50 (delen of totaal) en mengkruis.
- Fotonenergie berekenenFotonenergie berekenen uit golflengte, frequentie of energie in eV: resultaat in joule en elektronvolt, met impuls, rekenstappen en exacte constanten.
- Golflengte berekenenGolflengte berekenen uit de frequentie, of de frequentie uit de golflengte, voor licht, radio en geluid, in lucht, water of glas, met de fotonenergie.
- Logaritme berekenenLogaritme berekenen met elk grondtal: log, ln, log10 en log2 met stap voor stap het veranderen van grondtal, controle en schatting tussen twee gehele getallen.
- pH berekenen: pH-calculator met stapsgewijze uitwerkingBereken de pH van sterke en zwakke zuren en basen – exacte kwadratische oplossing, pKa/pKb of Ka/Kb, en omrekenen tussen pH, pOH, [H₃O⁺] en [OH⁻].
- Rekenmachine onlineGratis online rekenmachine: typ of tik en zie meteen de uitkomst – met volgorde van bewerkingen, haakjes, procent, wortel, tussenstappen en geschiedenis.
- Stengel en bladdiagramStengel en bladdiagram online: voer je getallen in en krijg stengels en bladeren direct geordend, met legenda, gesplitste stengels en de mediaan.
- Vergelijking oplossen onlineVergelijking oplossen met stappen: eerstegraads, tweedegraads en hogere vergelijkingen, met haakjes, breuken en controle. Gratis en zonder aanmelding.