Calculadora de ley de Beer-Lambert
Esta calculadora de ley de beer-lambert resuelve A = ε·l·c para la absorbancia, la concentración o el coeficiente de absorción molar. Ejemplo: ε = 6220 L/(mol·cm), 1 cm y 50 µmol/L dan A = 0,311.
Ejemplo: ¿Qué desea calcular: Absorbancia A (y transmitancia) · Coeficiente de absorción molar ε 6220 L/(mol·cm) · Camino óptico l (cubeta) 1 cm · Concentración c 50 µmol/L → Resultado: A = 0,311 · transmitancia T = 48,8652 %. Fuente: IUPAC Gold Book: Beer–Lambert law (A = ε·c·l). Actualizado: .
Cómo se calcula
La ley de Beer-Lambert describe cuánto atenúa una disolución la luz de una longitud de onda dada. La absorbancia A es proporcional a la concentración de la sustancia y al camino óptico: es la base de la fotometría.
Fórmula
A = ε · l · c, con el coeficiente de absorción molar ε en L/(mol·cm), el camino óptico l en cm y la concentración c en mol/L. La transmitancia es T = I / I₀ = 10^(−A) y, a la inversa, A = −log₁₀(T). Despejando: c = A / (ε·l) o ε = A / (l·c).
Ejemplo
El NADH absorbe a 340 nm con ε = 6220 L/(mol·cm). En una cubeta de 1 cm con c = 50 µmol/L, A = 6220 · 1 · 50 · 10⁻⁶ = 0,311 y la transmitancia es T = 10^(−0,311) = 48,8652 %. A la inversa, A = 0,311 con el mismo ε y l da c = 50 µmol/L, y de A, l y c resulta ε = 6220 L/(mol·cm). Con A = 1 pasa el 10 % de la luz; con A = 2, solo el 1 %.
- La absorbancia es logarítmica: un aumento de 1 significa diez veces menos luz transmitida.
- Conviene medir entre A = 0,1 y 1; por encima, diluya.
- La medida necesita un blanco (cubeta con disolvente) como cero.
Preguntas frecuentes
¿Qué diferencia hay entre absorbancia y transmitancia?
La transmitancia T es el porcentaje de luz que pasa; la absorbancia es A = −log₁₀(T/100). A = 0,311 equivale a T = 48,8652 %.
¿Cómo calculo la concentración a partir de la absorbancia?
Con c = A / (ε·l). Para A = 0,311, ε = 6220 L/(mol·cm) y l = 1 cm resultan 50 µmol/L.
¿Hasta qué absorbancia vale la ley?
Según el equipo, hasta A = 1 a 1,5 aproximadamente. Por encima influye la luz parásita y conviene diluir la muestra.
Fuentes y base legal
- IUPAC Gold Book: Beer–Lambert law (A = ε·c·l)
- Harris, Quantitative Chemical Analysis, Kap. „Spectrophotometry“
Última actualización: · Principios editoriales
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